公司名稱:南京康佰生物科技有限公司
地址:南京市雨花區長虹路222號
郵編:
電話:025-86880024
手機: 18066071954
聯系人: 蔣
傳真:
E-mail: duhaitao@cobioer.com
地址:南京市雨花區長虹路222號
郵編:
電話:025-86880024
手機: 18066071954
聯系人: 蔣
傳真:
E-mail: duhaitao@cobioer.com
技術文章
當前位置:首頁 > 技術文章
介紹ATCC細胞的細胞活化方式及冷卻保存方法
點擊次數:1013 發布時間:2021-02-23
ATCC細胞通常保存在凍存管中用干冰運輸,或是在培養瓶中常溫運輸。但對于中國客戶,由于運輸時間稍長,都是采用干冰運輸的方式。
在收到凍存細胞后,很重要的一點是迅速解凍使其立即復蘇并除去DMSO,然后將它們放置到培養基中。如果做不到上面這點,需將細胞存儲在液氮中(-130℃以下)。不要將凍存細胞儲存在高于-130℃的溫度下,這會使細胞存活率迅速下降。
為了確保ATCC細胞活力、遺傳基因型穩定和表型的穩定,細胞株的培養需要保持在對數期。這意味著需要定期對細胞進行傳代。并且注意在細胞進入生長平臺期之前,即單層細胞100%匯合長滿前或懸浮細胞達到其推薦的較大細胞密度之前,要進行細胞傳代。監測細胞生長和繪制每個細胞株的生長曲線都有助于確定細胞株的生長特性。
ATCC細胞的細胞活化方式:
1.冷凍細胞之活化原則為快速解凍,以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害,導致細胞之死亡。
2.細胞活化后,約需數日,或繼代一至二代,其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。
3.材料:37℃恒溫水槽、新鮮培養基、無菌吸管/離心管/培養瓶、液氮或干冰容器。
冷凍保存方法:
?。?)傳統方法:冷存管置于4℃10分鐘→ -20℃30分鐘→ -80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
?。?)ATCC細胞程序降溫:利用已設定程序的等速降溫機以-1~-3℃/分鐘之速度由室溫降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮槽vaporphase長期儲存。適用于懸浮型細胞與hybridoma之保存。
上一篇 GPCR細胞株的經過嚴格的測試 下一篇 人結腸癌細胞培養的相關解析