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ATCC細胞培養步驟
點擊次數：1373 發布時間：2017-12-27
ATCC細胞原理：
混合單個核細胞懸液在通過尼龍毛柱時，B細胞、漿細胞、單核細胞和一些輔助細胞被選擇性粘附于尼龍毛上，而多數T細胞則通過尼龍毛柱，這是獲得富含T細胞群的有效方法。
ATCC細胞培養步驟：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
ATCC細胞注意事項：
1、培養基于4℃條件下可保存3-6個月；
2、在ATCC細胞培養過程中，請注意保持無菌操作；
3、傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態；
4、如果您的實驗時間較長， 請在收到細胞后傳代時，按細胞量分種2瓶，使用其中的一瓶細胞實驗，其余的細胞先凍存起來。下次實驗需要時，再復蘇；
5、ATCC細胞培養技術只可用于科研。
ATCC細胞培養過程中需要測定細胞的存活率以了解細胞的生長狀態，鑒定細胞存活常用的方法有染色法和儀器分析法。染色法可直接通過細胞形態，區別細胞死亡，它是一種簡單的細胞存活鑒定方法。
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